隨后，我們進(jìn)行了如上所述的相同測(cè)量，但使用了temporin L。將temporin L添加到SOPC LUV中后，Ie和Im均降低（圖4，面板A和B），其減量在肽：脂質(zhì)摩爾比下趨于穩(wěn)定≈1:8.當(dāng)膽固醇（Xchol）0.10）包括在SOPC LUV中時(shí)，Ie和Im的減少有所減少，再次在1/1的時(shí)間脂質(zhì)化學(xué)計(jì)量比穩(wěn)定下來≈1/8.當(dāng)存在酸性磷脂POPG時(shí)，肽的作用非常不同。與temporin B相反，temporin L降低了含有酸性磷脂POPG的LUV的Im，在XPOPG）0.10時(shí)影響最大（圖4，面板A）。有趣的是，在XPOPG）0.10時(shí)，明顯存在明顯的不連續(xù)性，對(duì)應(yīng)于POPG:temporin L摩爾比為1:1，因此表明形成了化學(xué)計(jì)量絡(luò)合物。Im的減少在時(shí)間蛋白L：脂質(zhì)摩爾比下趨于穩(wěn)定≈1：5在XPOPG）0.10，而在XPOPG）0.20和0.40（圖4，面板A）時(shí)，連續(xù)衰減很明顯。隨著脂質(zhì)體中POPG含量的增加，Im的減少逐漸減弱。在XPOPG）0.10時(shí)，當(dāng)時(shí)間蛋白L：脂質(zhì)摩爾比為e時(shí)，Ie的值低于SOPC LUV的值≈1:8.超過該化學(xué)計(jì)量比，Ie的最大減量在XPOPG）0.10時(shí)明顯，并且在時(shí)間蛋白L：脂質(zhì)摩爾比下減量達(dá)到平臺(tái)≈1：5（圖4，面板B）。與Im類似，隨著XPOPG的增加，由時(shí)間蛋白L引起的Ie減少逐漸減弱。圖5，面板A描述了Temporain L對(duì)Ie/Im的影響。添加Temporain L后，SOPC LUV的Ie/Im略有增加（圖5，面板A），而在存在POPG時(shí)觀察到顯著增加。有趣的是，在XPOPG）0.10、0.20和0.40下，由于Temporain L導(dǎo)致的Ie/Im增量的微小差異很明顯≈1:10.然而，當(dāng)時(shí)間蛋白/脂質(zhì)的化學(xué)計(jì)量比大于≈1/8，在XPOPG）0.20和0.40時(shí)Ie/Im的增量顯著高于XPOPG）0.10時(shí)的增量。同樣，在XPOPG）0.40時(shí)，Ie/Im進(jìn)一步增加，高于1/1的時(shí)間蛋白/脂質(zhì)化學(xué)計(jì)量比≈1/6（圖5，面板A）。

圖5：通過芘標(biāo)記的磷脂PPDPC（X）0.01）的熒光和DPH（X）0.002的穩(wěn)態(tài)發(fā)射各向異性r評(píng)估顳葉素L對(duì)LUV中脂質(zhì)動(dòng)力學(xué)的影響，顯示為含XPOPG）0（0）、0.10（9）、0.20（B）和0.40（2）的SOPC脂質(zhì)體中歸一化準(zhǔn)分子與單體比率r（Ie/Im）（圖A）和各向異性r（圖B）的變化，Xchol）0.10（3）。每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)代表三次測(cè)量的平均值。標(biāo)準(zhǔn)偏差小于0.02（面板A）和0.004（面板B），為清楚起見，未顯示。否則情況如圖2圖例所示。

為了與上文所述的temporin B相同的目的，我們還測(cè)量了由temporin L誘導(dǎo)的DPH各向異性r的變化。與temporin B類似，當(dāng)將temporin L添加到SOPC和SOPC/膽固醇（Xchol）0.10）LUVs中時(shí)，r只有輕微變化（圖5，面板B）。然而，在含酸性磷脂的膜中，時(shí)間蛋白L導(dǎo)致酰基鏈順序強(qiáng)烈增加，明顯表現(xiàn)為DPH各向異性顯著增加（圖5，面板B）。r的增量隨著膜中XPOPG的增加而逐漸增加，高于時(shí)間蛋白L：脂質(zhì)摩爾比≈1:6.由于Temporain L導(dǎo)致含SOPC和酸性磷脂的膜的Ie/Im顯著增加，熒光脂質(zhì)PPDPC在這些膜中富集。

時(shí)間蛋白對(duì)膜拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的影響。巨大脂質(zhì)體是生物膜的優(yōu)秀模型，因?yàn)槠涑叽缗c細(xì)胞相當(dāng)。此外，它們可以通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察（15，21）。我們之前對(duì)馬加寧2和吲哚肽的研究表明，這些肽對(duì)巨大脂質(zhì)體膜的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)有顯著影響（15）。在本研究中，在類似條件下，通過顯微鏡觀察了在巨大囊泡外表面添加這些肽后，temporins對(duì)巨大脂質(zhì)體三維拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的影響。SOPC巨脂質(zhì)體即使暴露于大量該肽（約1.2 fmol的temporin B）（每個(gè)重復(fù)100份12 amol）時(shí)，也不受temporin B的影響。同樣，含有膽固醇（Xchol）0.10）的巨大囊泡也不受該量的顳葉素B的影響。然而，在將該肽添加到SOPC和SOPC/膽固醇（Xchol）0.10）巨大脂質(zhì)體的表面時(shí)，偶爾會(huì)觀察到相鄰囊泡之間的粘附（數(shù)據(jù)未顯示）。然而，在POPG（XPOPG）0.10的存在下，已經(jīng)≈36 amol（10-18 M）的顳葉素B（約60 fL，3次注射）施加在巨大囊泡表面上，引起巨大囊泡膜拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的顯著變化（圖6，面板B）。具體來說，小顆粒（φ≈10μm），然后進(jìn)入巨大脂質(zhì)體的內(nèi)腔（圖6，面板B）。進(jìn)一步增加≈0.24 fmol的顳蛋白B（約400 fL，20次注射）導(dǎo)致巨大囊泡內(nèi)這些顆粒的數(shù)量增加（圖6，面板C）。還觀察到巨大囊泡表面的顆粒聚集（圖6，面板C）。隨后，在≈10分鐘后，將顆粒轉(zhuǎn)移到巨大脂質(zhì)體的內(nèi)腔中。

圖6:temporin B誘導(dǎo)的巨大SOPC/POPG（XPOPG）0.1）脂質(zhì)體轉(zhuǎn)化的HMC圖像。添加temporin B之前的巨大囊泡（圖a），應(yīng)用后5秒≈36 amol顳蛋白B（面板B），添加≈0.24 fmol的顳蛋白B（面板C）。面板C中比例尺的長(zhǎng)度對(duì)應(yīng)于50μm。

然后我們研究了顳葉素L對(duì)巨大脂質(zhì)體的影響。圖7所示的圖像序列說明了由于temporin L引起的SOPC巨大脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)化。有趣的是，大約12 amol temporin L（1次注射）已經(jīng)影響了SOPC膜的外觀，在添加肽后1秒內(nèi)，巨大囊泡內(nèi)出現(xiàn)聚集結(jié)構(gòu)（圖7，面板B）。此外，相鄰的巨大囊泡也受到類似囊泡形成的影響（圖7，面板B，研究的巨大脂質(zhì)體下方）。進(jìn)一步添加temporin L（最多≈0.12 fmol，共10次重復(fù)注射）不會(huì)誘導(dǎo)進(jìn)一步的囊泡形成，而兩個(gè)“內(nèi)吞”聚集體粘附在肽微注射部位的巨大脂質(zhì)體表面。大約5分鐘后，這兩個(gè)“內(nèi)吞”聚集體粘附在一起，在巨大囊泡內(nèi)形成一個(gè)更大的聚集體結(jié)構(gòu)（圖7，面板C）。與顳葉素L對(duì)SOPC巨脂質(zhì)體的作用類似，該肽在POPG（XPOPG）0.10存在下誘導(dǎo)類內(nèi)吞過程，圖8）。更具體地說，在添加約12 amol的temporin L（1次注射）后，暴露于肽的巨大脂質(zhì)體表面的區(qū)域變暗，顯示折射率的顯著變化，并指示形成緊密堆積的三維結(jié)構(gòu)，僅部分保留在焦平面中（圖8，面板B）。在內(nèi)部≈1秒后，巨大脂質(zhì)體內(nèi)出現(xiàn)了小顆粒聚集體和暗區(qū)（圖8，面板C）。同時(shí)，還觀察到相鄰巨大囊泡中的囊泡形成（圖8，圖B和圖C）。隨后總共增加了≈24阿米爾的顳葉素L（2次注射）使另一組“內(nèi)吞”小顆粒出現(xiàn)在巨大脂質(zhì)體內(nèi)，與先前形成的聚集體粘附（圖8，面板D）。之后≈1分鐘，其中一些顆粒（φ≈8μm）從巨大脂質(zhì)體內(nèi)的雙層釋放（數(shù)據(jù)未顯示）。有趣的是，在進(jìn)一步添加約12 amol的Temporain L（總共3次注射）后，分離的小顆粒再次聚集，暗區(qū)的面積增加（圖8，面板E）。暗區(qū)面積的增加通過添加另一個(gè)≈24 amol temporin L（共5次注射）。幾分鐘后，聚集的“內(nèi)吞”小顆粒進(jìn)入巨大囊泡的內(nèi)腔，而膜表面的暗區(qū)消失（圖8，面板F）。同時(shí)觀察到相鄰的巨大脂質(zhì)體的囊泡形成。有趣的是，在膽固醇（Xchol）為0.10的情況下，需要更多的時(shí)間蛋白L來誘導(dǎo)囊泡形成（圖9）。然而，在添加約0.24 fmol（20次注射）的Tempolin L后，小顆粒的“內(nèi)吞”聚集物以及≈巨大脂質(zhì)體內(nèi)出現(xiàn)直徑為9μm的顆粒（圖9，面板B）。隨后添加≈0.24 fmol的肽（共40次注射）在巨大囊泡內(nèi)誘導(dǎo)另一組小顆粒，約30秒后與第一個(gè)聚集物合并（數(shù)據(jù)未顯示）。然而，隨后進(jìn)一步添加temporin L（高達(dá)約1.2 fmol，100次注射）對(duì)巨大脂質(zhì)體膜沒有進(jìn)一步的可見變化。

圖7：添加temporin L之前，添加temporin L后1s，由temporin L.巨大囊泡引起的SOPC巨大脂質(zhì)體轉(zhuǎn)化的HMC圖像（圖a）≈12 amol的temporin L（面板B），并在應(yīng)用總計(jì)≈0.12 fmol的temporin L（面板C）。面板C中比例尺的長(zhǎng)度對(duì)應(yīng)于50μm。

圖8:HMC圖像，描繪了應(yīng)用temporin L之前以及添加temporin L后立即（面板B）、1秒（面板C）由temporin L.巨大囊泡誘導(dǎo)的巨大SOPC/POPG（XPOPG）0.1）脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)化≈12 amol Temporain L，并在添加后立即（面板D）≈24 amol的顳葉素L。在注射了總計(jì)≈36 amol（E組）的temporin L，以及在添加總計(jì)≈60 amol temporin L。面板F中比例尺的長(zhǎng)度對(duì)應(yīng)于50μm。

圖9:HMC圖像序列，說明了在添加肽之前（圖a）和應(yīng)用肽后立即通過temporin L.巨大囊泡轉(zhuǎn)化SOPC/膽固醇（Xchol）0.10）巨大脂質(zhì)體≈0.24 fmol的temporin L（面板B）。面板B中比例尺的長(zhǎng)度對(duì)應(yīng)于50μm。

討論

我們的長(zhǎng)期目標(biāo)是建立最低的序列要求，這可以進(jìn)一步作為設(shè)計(jì)新型抗菌肽類似物的指導(dǎo)原則。我們之前已經(jīng)比較了兩種抗菌肽，馬蓋寧2和吲哚肽對(duì)本研究中使用的相同模型膜系統(tǒng)的影響，即。，單層、脂質(zhì)體和巨大囊泡（15）。我們?cè)缙谘芯恐惺褂玫碾氖沁x擇的，因?yàn)樗鼈兇韮煞N不同類型的抗菌肽家族。在本研究中，我們使用了兩種13個(gè)氨基酸的肽，即與吲哚肽長(zhǎng)度相似的肽。肽的結(jié)構(gòu)參數(shù)不同，如電荷、構(gòu)象、疏水性、疏水力矩和大小（表1）。有趣的是，在所研究的四種肽中，以摩爾為基礎(chǔ)計(jì)算的時(shí)間蛋白L最有效，作用于中性和酸性磷脂膜。與其他三種肽相比，其凈陽(yáng)離子電荷和疏水性具有平均值（表1）。然而，在所示的肽中，temporin L具有最高的平均疏水力矩，這表明這可能是與其有效的膜擾動(dòng)作用相關(guān)的一個(gè)重要參數(shù)，這與之前比較magainin 2和其他抗菌肽的研究一致（31）。

雖然上述抗菌肽對(duì)模型生物膜的作用存在明顯差異，但也存在一些明顯的相似之處。所有四種肽與脂質(zhì)的相互作用可以根據(jù)不同的過程進(jìn)行表征，如下所示。肽首先結(jié)合并插入膜。這一過程通過與酸性磷脂形成復(fù)合物而得到增強(qiáng)，并涉及形成復(fù)合物。插入伴隨著酰基鏈順序的增加。由于閾值肽：脂質(zhì)摩爾比，整體相互作用是協(xié)同的，意味著形成由肽酸性磷脂復(fù)合物組成的聚集結(jié)構(gòu)。最后，還形成了更宏觀的聚集體，這在顯微鏡圖像中很明顯。在下文中，我們將討論上述過程以及提供各自驅(qū)動(dòng)力的潛在機(jī)制。

與馬加寧2和吲哚西啶（15）類似，顳葉素B和L都具有高度的膜活性（圖1）。同樣，在酸性磷脂存在的情況下，所有四種肽與單分子膜的相互作用增強(qiáng)，與其凈正電荷保持一致（表1）。CD光譜表明，在疏水環(huán)境中，temporins采用R-螺旋結(jié)構(gòu)（13，Zhao和Kinnunen，未發(fā)表的數(shù)據(jù)）。此外，它們的螺旋輪投影揭示了兩親性。temporin B引起的π增加的動(dòng)力學(xué)與temporin L的動(dòng)力學(xué)不同（圖1，圖A和B），表明在前一個(gè)肽最初插入脂質(zhì)膜后，構(gòu)象和/或方向發(fā)生了變化。換句話說，時(shí)間蛋白B與脂質(zhì)單層的相互作用將包括以下步驟，即：（i）顳蛋白B與單層表面的結(jié)合，（ii）顳蛋白B嵌入脂質(zhì)膜，其長(zhǎng)軸可能平行于膜平面，以及（iii）肽的快速重新定向，垂直于單層表面。因此，后一個(gè)過程將導(dǎo)致觀察到的π突然下降（圖1，面板B）。然而，也可能在（iii）期間，與肽相關(guān)的一些POPG分子的方向不同于單分子膜大部分的磷脂，如吲哚肽（15）所示。

POPG的存在導(dǎo)致增強(qiáng)?π由于時(shí)間蛋白B在π<32 mN/m時(shí)，后一個(gè)值因此代表了?π-π0圖，類似于吲哚肽（15）。因此，低于后一個(gè)表面壓力，?π隨著XPOPG的增加而逐漸增加，而在π>32 mN/m時(shí)觀察到相反的情況。一個(gè)類似的“交叉”點(diǎn)，盡管在更高的表面壓力為≈43 mN/m對(duì)Temporain L也很明顯（圖1，面板D和E）。然而，對(duì)于該肽，隨著XPOPG的增加，πc明顯減少（圖1，圖E）。“交叉”點(diǎn)≈在我們之前的研究中觀察到吲哚肽為38 mN/m。然而，有趣的是，magainin 2（15）沒有這種特征。“交叉”點(diǎn)對(duì)這些肽作用機(jī)制的可能意義值得進(jìn)一步研究。對(duì)于真核細(xì)胞質(zhì)膜，平衡側(cè)壓力估計(jì)為≈32 mN/m（有關(guān)簡(jiǎn)要回顧，請(qǐng)參閱16、32）。據(jù)我們所知，原核生物膜的平衡側(cè)壓力未知。然而，似乎可以合理地假設(shè)，雙層的基本物理化學(xué)性質(zhì)可以決定兩種類型細(xì)胞中的側(cè)向壓力大小相似。從定性上講，更具表面活性的肽，顳葉素L和吲哚肽，具有較高的“交叉”壓力值。

本文報(bào)道的顳葉素B和顳葉素L對(duì)雙層脂質(zhì)動(dòng)力學(xué)的影響與之前報(bào)道的馬蓋寧2和吲哚肽的影響極為相似（15）。因此，DPH各向異性r的增加表明，在酸性磷脂POPG存在的情況下，所有這些肽都增加了酰基鏈順序，這種作用的幅度隨著XPOPG的增加而增加。同樣，在酸性磷脂的存在下誘導(dǎo)脂質(zhì)分離。所有這些效應(yīng)都表明了酸性磷脂以及肽的陽(yáng)離子電荷對(duì)于后者與生物膜相互作用的重要性。對(duì)于magainin 2和Tempolin B，在POPG存在下，SOPC和SOPC/膽固醇（Xchol）0.10）脂質(zhì)體中的芘熒光猝滅被消除，而對(duì)于Tempolin L和吲哚青素，無論脂質(zhì)成分如何，都觀察到了這一過程。芘和色氨酸之間的π-π相互作用以及肽（15）的堿性殘基與熒光團(tuán)的接觸導(dǎo)致π-陽(yáng)離子相互作用（33）可能參與猝滅。此外，在肽的存在下，熒光團(tuán)的微環(huán)境可能變得更親水，從而降低熒光量子產(chǎn)率。與馬蓋寧2和吲哚肽（15）相反，在膽固醇（Xchol）0.10存在的情況下，由Temporanins B和L引起的芘淬滅減弱，因此表明膽固醇可能抵消后兩種肽的膜插入。

在XPOPG）0.40時(shí)，顳葉素B在肽：脂質(zhì)摩爾比為≈1：30而在該化學(xué)計(jì)量比之上，Ie/Im降低（圖3，面板A）。由于在XPOPG）0.40處，顳蛋白B與膜的強(qiáng)烈相互作用，不同的作用可能有助于減少芘脂質(zhì)類似物的準(zhǔn)分子形成，如下所示。首先，膜結(jié)合的顳蛋白B可以代表熒光探針橫向擴(kuò)散的機(jī)械屏障。換句話說，膜相關(guān)肽可以通過占據(jù)探針的相鄰位置靜態(tài)減少準(zhǔn)分子的形成，從而增加芘標(biāo)記脂質(zhì)在碰撞之間擴(kuò)散的路徑長(zhǎng)度。其次，由于肽-脂質(zhì)相互作用，鄰近肽的脂酰基鏈的旋轉(zhuǎn)自由度可能會(huì)降低。第三，與肽相鄰的脂質(zhì)可以部分固定，因此它們的交換頻率（以及該區(qū)域中芘分子的交換頻率）顯著低于大塊脂質(zhì)基質(zhì)中的交換頻率。相反，對(duì)于temporin L，Ie/Im的值隨著XPOPG的增加而逐漸增加。同樣，當(dāng)肽：脂質(zhì)摩爾比>1:6時(shí)，DPH各向異性r的增加取決于XPOPG（圖5）。該化學(xué)計(jì)量學(xué)可表示閾值濃度，高于該濃度時(shí)，酸性磷脂膜中發(fā)生協(xié)同肽插入和重排。temporin L的單個(gè)Trp殘基可以促進(jìn)其分配到脂質(zhì)雙層（34），并且在酸性磷脂存在的情況下，temporin L可能插入膜更深，或者膜中的肽量可能隨著XPOPG的增加而增加。與含有五個(gè)色氨酸殘基的吲哚西啶相比，temporin L只有一個(gè)色氨酸殘基，凈正電荷少一個(gè)（表1）。然而，顳葉素L在含SOPC和POPG的膜中更有效地淬滅芘標(biāo)記的脂質(zhì)。顳葉素L比吲哚肽疏水性更強(qiáng)，具有更大的疏水力矩（表1）。這些性質(zhì)可以促進(jìn)顳葉素L插入脂質(zhì)雙層。

我們對(duì)芘標(biāo)記脂質(zhì)的研究表明，temporin B和temporin L在SOPC以及SOPC/POPG膜中引起脂質(zhì)側(cè)向分離，從而形成富含肽的微區(qū)。對(duì)于酸性磷脂膜，這些結(jié)構(gòu)域可能與雙層中孔的形成有關(guān)。帶負(fù)電的脂質(zhì)的存在有助于減少帶正電的肽之間的排斥靜電，從而允許它們?cè)谀ぶ芯奂８唧w地說，正如馬加寧2和吲哚肽（15）所建議的那樣，肽首先會(huì)積聚在雙層的外小葉中。在達(dá)到閾值表面濃度后，雙分子層中的肽將以合作的方式重新定向。因此，當(dāng)陽(yáng)離子肽和酸性磷脂在雙層表面上共分離成微區(qū)時(shí)，可實(shí)現(xiàn)高局部肽濃度。然后，這種不對(duì)稱性將通過形成由肽和脂質(zhì)的超分子聚集體構(gòu)成的“通道”或“孔”來緩解，從而允許肽擴(kuò)散到雙層的內(nèi)小葉中。同時(shí)，雙層結(jié)構(gòu)將局部失穩(wěn)。孔形成作為這一過程的中間步驟是可以想象的，因?yàn)闀r(shí)間蛋白已被證明可誘導(dǎo)脂質(zhì)體包埋熒光探針的釋放（13）。較長(zhǎng)的線性肽，如馬蓋寧2和mellitin在人工膜中形成孔（28、35），跨膜肽通道的最小長(zhǎng)度約為23個(gè)殘基。就時(shí)間蛋白而言，區(qū)分目前提出的孔隙模型將特別有趣。它們可以以更復(fù)雜的方式形成孔，可能涉及肽的二聚化（9）。與馬蓋寧2和顳葉素B相反，顳葉素L和吲哚西啶會(huì)引起SOPC和SOPC/膽固醇（Xchol）0.10）巨大囊泡的水泡化，這可能與其溶血活性有關(guān)（36，Simmaco，M.，未發(fā)表的觀察結(jié)果）。在這方面，比較上述抗菌肽與從歐洲蜜蜂中分離出的高度溶血性肽mellitin的效果很有意義。抗菌肽magainin 2和temporin B對(duì)含有負(fù)電荷磷脂的膜有顯著影響，而對(duì)中性膜的影響較小。雖然溶血肽temporin L和indolicidin優(yōu)先與酸性磷脂結(jié)合，但它們也與兩性離子膜表現(xiàn)出強(qiáng)烈的相互作用。顳葉素L尤其如此，它誘導(dǎo)中性巨囊泡的顯著囊泡化。有趣的是，mellitin在兩性離子膜中誘導(dǎo)各種形態(tài)不同的相，這取決于肽脂比和脂質(zhì)的相態(tài)，包括多層膜的囊泡化、小脂質(zhì)囊泡的融合，以及碎裂成圓盤和膠束（37）。然而，在帶負(fù)電的磷脂POPG存在下，其滲透兩性離子磷脂囊泡的能力顯著降低。提出了中性多層膜中的跨雙層取向，但在帶負(fù)電的多層膜中沒有（38）。因此，這些數(shù)據(jù)表明兩性離子膜和這些肽之間存在明顯的疏水相互作用，使后者溶血，而靜電相互作用似乎是其抗菌活性所必需的。為此，哺乳動(dòng)物質(zhì)膜的外小葉僅由兩性磷脂組成，而細(xì)菌膜包含大量酸性磷脂、磷脂酰甘油和心磷脂（39）。

有趣的是，我們實(shí)驗(yàn)室迄今為止研究的所有肽在巨大囊泡中也誘導(dǎo)類似內(nèi)吞的過程，然而在聚集結(jié)構(gòu)中觀察到的差異表明四種肽與膜的結(jié)合模式不同。顯微鏡圖像顯示宏觀聚集體的形成是不對(duì)稱的，即發(fā)生在巨大的囊泡內(nèi)。與我們關(guān)于鞘磷脂酶形成神經(jīng)酰胺的研究類似（21），抗菌肽作用的矢量性質(zhì)表明，其不對(duì)稱應(yīng)用于外表面會(huì)增加膜的彎曲剛度和負(fù)的自發(fā)曲率。然而，機(jī)制的闡明需要進(jìn)一步研究。顯微鏡下可見的聚集體的性質(zhì)令人感興趣。為此，提出了層狀液晶相不代表熱力學(xué)平衡的可能性。因此，已證明二甲基磷酸甘油轉(zhuǎn)化為所謂的“海綿”相（40）。控制這一階段形成的因素仍知之甚少；然而，脂質(zhì)-頭群相互作用似乎很重要。一個(gè)有趣的可能性是，除了對(duì)雙層膜的其他作用外，這些抗菌肽還可以觸發(fā)細(xì)菌脂質(zhì)磷脂酰甘油從層狀液晶狀態(tài)過渡到“海綿”相，后者代表熱力學(xué)平衡。在熱力學(xué)水平上，這也將為在巨大脂質(zhì)體中觀察到的肽-脂質(zhì)復(fù)合物的宏觀聚集提供驅(qū)動(dòng)力。然而，在這種情況下，機(jī)械基礎(chǔ)也需要進(jìn)一步研究。